Gru dan Lucy beserta anak-anak perempuan mereka—Margo, Edith, dan Agnes—menyambut anggota baru keluarga Gru, Gru Jr., yang berniat menyiksa ayahnya. Gru juga menghadapi musuh bebuyutan baru, Maxime Le Mal, dan kekasihnya yang femme fatale, Valentina, yang memaksa keluarga itu untuk melarikan diri.